[Вы должны быть зарегистрированы и подключены, чтобы видеть эту ссылку]

[Вы должны быть зарегистрированы и подключены, чтобы видеть эту ссылку]

До 1986 года считалось, что эрлихиоз - это проблема чисто ветеринарная, но в 1986 году у 51-летнего мужчины из Детройта, укушенного клещом в районе Арканзаса, в крови были обнаружены эрлихии. В 1990 году агент человеческого ehrlichiosis был изолирован от крови резервиста армии США в Форте Chaffee, Арканзас, далее была проведена генетическая экспертиза возбудителя, и он был назван E. chaffeensis.

Благодаря молекулярной диагностике, на сегодняшний день на практике стало возможным реально решать некоторые клинические проблемы, в том числе по диагностике инфекционных заболеваний. Благодаря особенностям построения праймеров, мы можем построить праймеры для накопления сиквенсов, общих для нескольких возбудителей не только одного вида, но рода и даже семейства. То есть мы можем моделировать диагностический поиск и вести его по принципу от большого к малому. Особенно это актуально в такой стране, как Россия, в которой диагностика инфекционных заболеваний у мелких домашних животных, исключая отдельные регионы, просто отсутствует и отсутствовала всегда.

Разберем несколько инфекционных заболеваний, хорошо всем известных, и не очень, которые являются причиной как манифистированных форм заболевания, так и лихорадки неясного генеза. Одним из таких заболеваний является эрлихиоз.

Наибольшую известность эрлихиоз получил после вспышки инфекции у британских военных собаках в Сингапуре в 1963году и у военных собак Соединенных Штатов во Вьетнаме. Эпизоотия началась в 1968 году, что привело к гибели более чем 200 собак в течение 4-х лет, все собаки погибли от тяжелой панцитопении.

Дальнейший генетический анализ гена 16 рРНК, гена белков теплового шока привел к переклассификации рода Ehrlichia. В настоящее время он включает E. cansis, E. chaffeensis, E. ewingii, E. muris и E. (Cowdria) ruminantium. Эти разновидности объединены в геногруппу E. cansis, тогда как такие возбудители, как E. phagocytophila и E. equi, стали одним видом A. phagocytophilum, E.platus, стала А.platus, E. ristici теперь называется N. Ristici.

ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РОДСТВО ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ЭРЛИХИОЗА

Таким образом, хорошо нам известное заболевание на сегодняшний день распалось на анаплазмоз, эрлихиоз и неорекитсиоз собак. Однако в отечественной литературе об этом нет упоминаний, а в зарубежной, ввиду сходства клинических признаков и методов лечения, для удобства все эти инфекции объединяют в одно заболевание - эрлихиоз.

На сегодняшний день токсономия возбудителей эрлихиоза и их генетическое родство выглядят следующим образом.

Царство Procariotae; Тип Proteobacteria; Class Alphaproteobacteria ; Порядок Rickettsiales
[Вы должны быть зарегистрированы и подключены, чтобы видеть это изображение]
Мы видим, что генетическая группа E.canis включает эрлихию жвачных и грызунов, тогда как неорикетсии и анаплазмы стоят особняком.

Жизенный цикл эрлихий с включением в цикл собак


[Вы должны быть зарегистрированы и подключены, чтобы видеть это изображение]
Эрлихии и анаплазмы передаются через клещей, при этом могут поражаться несколько видов животных. Почти во всех случаях природным резервуаром являются дикие животные. Так, для E. chaffeensis резервуаром в природе могут являться олени и даже грызуны.




НОМЕНКЛАТУРА ПЕРЕНОСЧИКОВ ЭРЛИХИОЗА
[Вы должны быть зарегистрированы и подключены, чтобы видеть это изображение]
Основными переносчиками эрлихиозов у собак являются клещи отряда иксодит: Ixodes persulcatus, Ixodes ricinus, Ixodes scapularis, Dermacentor variabilis, Amblyomma mericanum, Rhipicephalus sanguineus

ВИДЫ ЭРЛИХИЙ, ПАРАЗИТИРУЮЩИЕ НА СОБАКАХ

Виды эрлихий, паразитирующие на собаках
Вид	Вызываемое заболевание	Вектор передачи	Географическое распространение
Ehrlichia canis собаки, волки, шакалы, человек	Моноцитарный эрлихиоз собак (CME)	Rhipicephalus sanguineus, Dermacentor variabilis	Во всем мире
Ehrlichia chaffeensis собаки, олени, лошади, грызуны, человек	Моноцитарный эрлихиоз собак (CME)	Amblyomma americanum, Dermacentor variabili I.persulcatus (Россия)	США, Европа, Африка, Пермь
Ehrlichia ewingii собаки, человек	Гранулоцитарный эрлихиоз собак (CGE)	Amblyomma americanum Otobius megnini	США
Anaplasma phagocytophilum собаки, КРС, козы, овцы, дикие жвачные, лошади, человек	Анаплазмоз собак Гранулоцитарный эрлихиоз собак	Ixodes ricinus (Европа) Ixodes scapularis Ixodes pacificus (Северная Америка) I.persulcatus (Россия)	Повсеместно, все зоны с умеренным климатом Кемерово, Свердловск, Челябинск, Новосибирск, Хабаровск, Алтай, Томск, Балтийский регион
Anaplasma platys собаки	Циклическая тромбоцитопения собак Поражает тромбоциты	Rhipicephalus sanguineus	США, Средиземноморье, Израиля, Tайваня,
Neorickettsia risticii собаки, кошки, волки, свиньи, козы	Моноцитарный эрлихиоз собак, нетипичный синдром	Зараженные трематоды в улитках и водных насекомых	США, Канада, Франция, Индия

В этой таблице представлены данные о возбудителях эрлихиоза, анаплазмоза и неорикетсиоза, о переносчиках этих заболеваний и восприимчивых животных. Данных о распространении различных видов эрлихий у собак по территроии Российской Федерации нет, есть отдельные публикации об эрлихиозе человека, вызванном главным образом Anaplasma phagocytophilum и Ehrlichia chaffeensis. Необходимо отметить, что серьезный анализ заболеваемости эрлихиоза в России проводится главным образом в рамках изучения клещевого энцефалита, а как отдельной самостоятельной инфекции эрлихиозу практически не уделяется внимания.

КЛАССИФИКАЦИЯ ЭРЛИХИЙ ПО ПОРАЖАЕМЫМ ИМИ КЛЕТКАМ
[Вы должны быть зарегистрированы и подключены, чтобы видеть это изображение]
Но вернемся к нашей проблеме. Долгое время в отечественной литературе эрлихиоз делили на моноцитарный и гранулоцитарный, такую классификацию привели медики, такую приняли и ветеринарные врачи. Считалось, что моноцитарный эрлихиоз вызывают Ehrlichia chaffeensis, Ehrlichia canis, Neorickettsia risitci , поскольку заражают мононуклеарные лейкоциты (моноциты и макрофаги). Гранулоцитарный эрлихиоз вызывают Ehrlichia ewingii, Anaplasma phagocytophilum. Но на сегодняшний день установлено, что отдельные возбудители способны заселять более, чем один вид клеток, такое деление достаточно условно, и сейчас все чаще используют видовое название эрлихиоза.

КЛИНИЧЕСКОЕ ТЕЧЕНИЕ ЭРЛИХИОЗА

Наиболее частые симптомы, с которыми сталкивались мы, это кровоизлияния на слизистых и коже, увеиты и некротические стоматиты.

[Вы должны быть зарегистрированы и подключены, чтобы видеть это изображение]
Клиническое течение

[Вы должны быть зарегистрированы и подключены, чтобы видеть это изображение]

На последнем фото – собачка по кличке Калвин, которая заболела анаплазмозом, вызванным Anaplasma phagocytophilum. Заболевание было установлено в хронической стадии, когда начали развиваться необратимые изменения, миелит с парезом и затем параличом задних конечностей. Заболевание сопровождалось длительными периодами анемии и тромбоцитопении, животное несколько раз выводили из комы, и несмотря на интенсивную терапию Калвин погиб.

Клиническое течение

[Вы должны быть зарегистрированы и подключены, чтобы видеть это изображение]

Инкубационный период (7-21 день).

1. Острая фаза (лихорадка, васкулиты, лимфаденит, анорексия, астения, рвота, диарея, отеки (конечностей и мошонки), выделения из носа, кашель) 2-4 недели, через 6-9 недель иммунокомпетентное животное должно избавиться от эрлихиоза. Если этого не происходит, то заболевание переходит в латентную стадию.
   
2. Субклиническая (латентная) фаза (от 1 мес. до 3 лет, гиперглобулинемия, тромбоцитопения).
   
3. Хроническая фаза (перемежающаяся лихорадка, кровотечения, спленомегалия, лимфаденомегалия, увеит, артрит (Ehrlichia ewingii), полимиозиты, менингоэнцефалиты, гломерулонефриты (Neorickettsia risticii, миелиты, парезы и параличи, аборты), летаргия, потеря веса PANCYTOPENIA, ПОДАВЛЕНИЕ КОСТНОГО МОЗГА И КРОВОИЗЛИЯНИЕ epistaxis, hematuria, melena, и petechiae и ecchymoses.
   

• При эрлихиозе, вызванном E. canis, развивается заболевание средней тяжести; основные признаки: лихорадка, летаргия, анорексия, потеря веса, рвота, диарея, выраженная тромбоцитопения и невыраженная нерегенеративная анемия с неэффективным эритропоэзом.
  
• При эрлихиозе, вызванном E. ewingii (невосприимчив к ципрофлоксацину), основными клиническими признаками являются хромота и отеки суставов, развивается полиартрит.
  
• E. risticii вызывает нетипичный синдром – летаргию, полиартрит (воспламенение нескольких суставов).
  
• А. phagocytophilum может вызвать болезненный артрит в нескольких суставах, летаргии, лихорадку, потерю аппетита, рвоту и диарею. При переходе от субклинической инфекции до острого проявления заболевания, наблюдается анорексия и летаргия. Дисфункция центральной нервной системы и хромота были также зарегистрированы у некоторых собак.
  
• Anaplasma platys является причиной инфекционной циклической тромбоцитопении собак. Заболевание клинически слабо выражено, но может быть ЛНГ, почти всегда разрешается без развития хронической формы.
  
• И хозяева животных и ветеринарные врачи должны помнить, что эрлихиоз и анаплазмоз излечим только в острую стадию заболевания, при развитии хронического эрлихиоза заболевание у собак заканчивается летально.
  

ДИАГНОЗ НА ЭРЛИХИОЗ
[Вы должны быть зарегистрированы и подключены, чтобы видеть это изображение]

Прогноз на потенциально неизлечимое заболевание, которым является эрлихиоз, делает диагноз эрлихиоза в современной ветеринарии очень актуальной проблемой. Поскольку чувствительность световой микроскопии мазков по обнаружению морул не превышает 20%, полагаться на этот тест нельзя, а в латентной стадии чувствительность этого метода стремится к нулю. Но если в Европейский странах и США уже в течение 30 лет можно было провести иммуноферментный анализ на эрлихиоз, то в Россию такие диагностикумы не поступают. Новый тест в ELISA фирмы IDEXX для определения наличия антител на эрлихиоз, болезнь Лайма и Е.canis приспособлен только для обнаружения антитела против Ehrlichia canis.

В Ростовской области Ehrlichia canis не распространена, и этот тест будет давать отрицательные результаты даже при наличии эрлихиоза, если он вызван отличным от Ehrlichia canis возбудителем.

Общие результаты на обычных анализах крови включают лейкопению, тромбоцитопению и поднятые трансаминазы сыворотки и гипергамаглобулинемию, и эта триада должна побудить врачей к диагностике. Наличие такой триады и положительные тесты в ПЦР- динамике позволят судить об активности заболевания и возможном прогнозе.

С точки зрения своевременности самый полезный диагностический тест на эрлихиоз - ПЦР (PCR). Чувствительность метода составляет в пределах 60-85 % для E. chaffeensis; чувствительность для E. ewingii инфекции не известна, но ПЦР (PCR) - единственный диагностический тест на E. Ewingii и другие эрлихиозы и анаплазмозы. Чувствительность ПЦР зависит от антибиотикотерапии, результат может быть отрицательным, и забор крови должен проводиться до назначения химиотерапии.

Диагностика эрлихиоза методом ПЦР активно применяется за рубежом. Ситуация в России уникальна тем, что у нас так и не появились в достаточном количестве отличные от ПЦР методы диагностики, и вместе с тем мы активно вступаем в мир молекулярной диагностики. Хочется верить, что в данном методе мы не отстанем от всего мира так сильно, как это произошло за предыдущий период развития диагностики этого заболевания.

Видовая идентификация позволяет более точно ставить диагноз на развитие хронической формы эрлихиоза с неблагоприятным прогнозом, как видим, есть существенные отличия у разных видов возбудителя этого заболевания.
Кроме того, поставив диагноз в острую стадию заболевания, ветеринарный врач всегда должен провести терапию, которая в эту стадию может оказаться очень эффективной.

Латентная стадия заболевания может закончиться полным выздоровлением, но, учитывая плохой прогноз даже в небольшом проценте заболевания (а особенно у немецких овчарок), положителный ПЦР-тест должен побудить ветеринарного врача к назначению 3-х недельного курса доксициклина; еще через 3 недели необходимо повторить тест методом ПЦР, поскольку критерии латентной стадии заболевания и хронической стадии достаточно условны. Отрицательная динамика гематологической триады (лейкопения, тромбоцитопения и гипергамаглобулинэмия) при сохранении положительного ПЦР-теста дает основание предполагать персистенцию возбудителя и высокую вероятность развития хронического эрлихиоза.

Таким образом, с появлением даже некоммерческих ПЦР-тестов для диагностики эрлихиоза у ветеринарного врача есть возможность полностью разобраться еще в одной нозологической форме лихорадки неясного генеза, подобрать актуальную терапию и построить правильный прогноз. И несмотря на то, что он может оказаться неутешительным, мы всегда должны об этом информировать владельцев животного.

источник

[Вы должны быть зарегистрированы и подключены, чтобы видеть эту ссылку]

Эрлихиозы собак - природноочаговые. трансмиссив-ные инфекции которые вызываются внутриклеточными W микроорганизмами рода Ehrlichia и протекают в виде острых лихорадочных заболеваний. Различают моноцитарный (поражающий моноциты) и гранулоцитарный (поражающий нейтрофи-лы) эрлихиозы собак. Этиологию моноцитарного эрлихиоза собак связывают с Е. canis и Е. chaffensis. получившей самостоятельный видовой статус только в начале 90-х годов. Гранулоцитарный эрли-хиоз у собак связывают с инфекцией Е. phagocytophila и Е. platus [2 3 4. 5] Эрлихии попадают в организм животного со слюной зараженного клеща По зарубежным данным инкубационный период продолжается от 1 до 21 дней, а манифестное заболевание - две-три недели. Клинические симптомы эрлихиоза весьма полиморфны. В острый период, кроме лихорадки и признаков интоксикации наблюдается тромбоцитопения. лейкопения, анемия, повышенные уровни аланинаминотрансферразы. креатинина [6 7] Клинически у таких животных может отмечаться субэктеричность и иктеричность склер, на фоне лихорадки у таких животных часто диагностируют пироплазмоз, кроме того эрлихиозы могут протекать на фоне пироплазмоза, что требует дифференциальной диагностики [1. 7].

Цель и задачи исследования. Исходя из вышеизложенного целью нашей работы явилось уточнение клинических, лабораторных и морфологических особенностей эрлихиоза. проведение морфологических исследований печени у собак при эрлихиозе. Материл и методы исследования.

Для решения поставленных задач нами было обследовано 47 собак с диагнозом эрлихиоз, который был поставлен методом выделения ДНК возбудителя в ПЦР Все павшие животные были подвергнуты посмертному патологоанатомическому вскрытию с последующим морфологическим исследованием печени.

Из образцов печени, фиксированных в формалине и заключенных в парафин, изготовляли серийные срезы толщиной 4 мкм с последующей окраской гематоксилином и эозином С помощью ШИК-реакции (реакция Шифф-йодной кислотой. ГА. Меркулова. 1969) выявляли гликоген и гликопротеины. Углеводы, содержащие гексозу. окрашиваются в красно-лиловый цвет (эндотелий сосудов), а гликоген - в более интенсивный темно-красный Результаты исследований.

В весенне-летний период 2009 года в ветеринарные клиники г. Ростова поступили 2384 собаки с острыми лихорадочными заболеваниями, возникшими после присасывания клещей. Из них у 47 животных методом ПЦР был установлен диагноз эрлихиоз. Всем этим животным было проведено детальное обследование Обследование включало получение подробных анамнестических и объективных данных осмотра животного на предмет неврологического дефицита, офтальмалогической патологи, были проведены неоднократные динамические общеклинические исследования (гемограмма, биохимический анализ крови с определением активности АЛат АСаТ мочевины, креатинина) Для исключения других сезонных инфекционных и инвазионных заболеваний были проведены дополнительные исследования с соответствующими диагнос-тикумами.

Анализ клинических проявлений в остром периоде болезни позволил выявить преобладание у большинства обследованных животных общеинфекционного синдрома, характеризующегося лихорадкой, анорексией адинамией и слабостью задних конечностей (Таблица 1).

Таблица 1. Клинические проявления эрлихиоза у собак

[Вы должны быть зарегистрированы и подключены, чтобы видеть это изображение]



Начальная стадия гипертермии у значительной части больных животных сопровождалась умеренным или незначительно выраженным ознобом. Температура часто достигала фебрильных цифр - от 39.5 С до 40.3 С. реже была субфебрильной. Длительность лихорадочной реакции в основном составляла 1-6 дней, но иногда продолжалась до 10-12 дней Катаральные явления со стороны верхних дыхательных путей отмечены у 1/4 больных собак. При осмотре кожных покровов и слизистых оболочек у трех собак была выявлена гиперемия слизистых, а у 9 больных собак - инъекция сосудов склер и конъюнктив. У 29 пациентов отмечалось увеличение подчелюстных лимфоузлов от 0.7 до 1.2 см в диаметре. Общемозговые симптомы в виде неуверенной походки, ригидности мышц, рвоты наблюдались практически у 10% животных. У двух собак выявлены парестезии, а у одной из них - имели место ме-нингеальные симптомы (ригидность затылочных мышц, симптом Кернига). В спинномозговой жидкости у троих пациентов выявлен лимфоцитарный плеоцитоз - от 25 до 431 кл в 1 мл. Изменений в количестве белка, глюкозы хлоридов не обнаружено. Поражение опорно-двигательного аппарата отмечалось в виде миалгий. преимущественно задних конечностей и артралгии. иногда возникали боли в области позвоночника. Вовлечение в патологический процесс сердечно-сосудистой системы проявлялось умеренной тахикардией (до 100 в минуту). У всех больных животных выявлено незначительное увеличение размеров печени, край которой выступал из под реберной дуги на 1-2 см. У 17 животных гепатомегалия сопровождалась субиктеричностью склер, темной окраской мочи, изменениями функциональных проб печени. У 41 собаки имело место повышение активности АЛаТ и АСаТ (257-455 Е/ л) и (или) увеличение креатинина (147-183 ммоль/ на л), однако клинические проявления острой почечной недостаточности не были выявлены ни у одного из животных.

Наиболее выраженные изменения были зарегистрированы в гемограмме больных эрли-хиозом собак. У 29 обследуемых животных наблюдалась гипохромная анемия со снижением количества эритроцитов до 3.1x1012/ на литр и гемоглобина до 80 мг/ л. У 33 собак имела место тромбоцитопения - 110-90х109/л. у 16 - лейкопения от 2.3 до 4 7х109/л у 14 - увеличение СОЭ от 27 до 56 мм/час. У 3 животных наблюдалось двухволновое течение заболевания, которое характеризовалось некоторыми особенностями. В большинстве случаев вторая волна имела более тяжелое течение что проявлялось высокой и длительной лихорадкой, выраженными симптомами интоксикации

Таким образом, анализ клинической картины эрлихиоза у собак позволил установить острое течение инфекции с непродолжительной инкубацией. Начальный период характеризуется развитием выраженного общеинфекционного синдрома при отсутствии патогномоничных признаков заболевания Превалирует фебриль-ная температура с продолжительностью лихорадочной реакции не более 10-12 дней. Органная патология проявляется поражением нервной системы. Нередко развивается серозный менингит, картина которого в целом не отличается от аналогичных менингитов другой этиологии. Поражение печени проявляется развитием острого безжелтушного гепатита с легким течением В то же время не исключается и возможность нарушения пигментной функции печени. К особенности наблюдавшегося нами эрлихиоза можно отнести частое развитие двухволнового течения, при котором вторая волна в большинстве случаев протекает тяжелее, с более выраженным общеинфекционным синдромом и серозным менингитом. Для диагностики раннего периода заболевания важны достаточно стереотипные изменения в гемограмме тромбоцитопения. лейкопения, повышение СОЭ. Отсутствие патогномоничных симптомов в клинической картине эрлихиоза существенно затрудняет распознавание инфекции без ее верификации в реакции ПЦР.

У 3-х павших от эрлихиоза собак были проведены морфологические исследования печени. Отмечено мозаичное изменение органа с чередованием различных участков поражения.

Изменения в участках поражения характеризовались одно-или многоцентральным распределением лимфоцитов и плазматической рассеянной инфильтрацией в портальной триаде и печеночных дольках (рис. 1) Гепатоциты были гистологически нормальными.
[Вы должны быть зарегистрированы и подключены, чтобы видеть это изображение]

Отмечались участки характеризующиеся лимфоцитарными инфильтратами портальных триад и печеночных долек. Отмечались фокальные некрозы, локальные расширения синусов с инфильтрацией лимфоцитами и мононуклеарными клетками (рис. 2, 5).


[Вы должны быть зарегистрированы и подключены, чтобы видеть это изображение]


В участках с выраженными изменениями они. чаще всего соответствовали портальному и лобулярному морфологическим вариантам поражения органа При портальном варианте обнаруживали отёк и расширение портальных трактов с инфильтрацией ихлимфо-гистиоцитарными элементами. Гепатоциты находились в состоянии гидропической и жировой дистрофии (рис. 6, 7,8). При лобулярном варианте гепатита чаще обнаруживались некрозы печёночных клеток (рис. 5). иногда они носили сливной характер, располагались преимущественно в центральных отделах печеночных долек. Отмечалась лимфоцитарная и моноцитарная инфильтрация портальных трактов от умеренной до выраженной, единичные ступенчатые некрозы гепатоцитов. гепатоциты в состоянии гидропической дистрофии слабой и умеренной степени (рис. 5, 6)

В портальных трактах отмечалась пролиферация эпителия в междольковых желчных протоках. Однослойное строение тяжей (балок) гепатоцитов местами было нарушена, отмечалась выраженная их извитость, и узлы регенерации, гепатоциты выстраивались в виде розеток, но уже в этих розетках регенерации отмечался каликвационный некроз (рис. 3). В синусоидах отмечалась дегенерация эндотелиальных клеток, местами их десквамация и гибелью гепатоцитов и пролиферацией клеток Купфера. В гепатоцитах центральных отделов долек отмечалась гидропической или баллонной дистрофии. Вместе с тем рассеяно по всем дольками печени встречались гепатоциты в состоянии гиалиновокапельной дегенерации которая местами доходила до формирования телец Каунсильмена (рис. 2), крайней степени гиалиновокапельной дегенерации с некрозом гепатоцита. В некоторых полях отмечалось проникновение инфильтрата из лимфоцитов, макрофагов, плазматических клеток через пограничную пластинку в печеночную дольку. Некрозы носили ступенчатый характер, но локально отмечались мостовидные и субмассивные поражения. Деструкция гепатоцитов сочеталась с очаговой или диффузной пролифе-рацией звездчатых ретикулоэндотелиоцитов и клетокхолангиол (рис. 5. 3).

Заключение.

Таким образом, на основании комплексного эпизоотологи-ческого и клинического исследования получены данные о клиническом течении эрлихиоза у собак которые следует рассматривать лишь как первый шаг в изучении этой новой для нашего региона проблемы инфекционной патологии.

Для диагностики раннего периода эрлихиоза собак характерны изменения в гемограмме тромбоцитопения лейкопения, повышение СОЭ. Отсутствие патогномоничных симптомов в клинической картине эрлихиоза существенно затрудняет распознавание инфекции без ее верификации в реакции ПЦР. Поражение печени проявляется развитием острого, безжелтушного гепатита. Гистологически отмечаются дистрофические и некробиотические изменения гепатоцитов с формированием ступенчатых некрозов, пролиферацией гепатоцитов с формированием розеток, и последующим их некрозом. На фоне гидропической и жировой дистрофии отмечается дессиминированная геалиновокапельная дегенерация гепатоцитов с формированием телец Каунсильмана.